尊龙凯时-人生就是博推出的聚合酶链式反应(PCR)是一项能够在体外有效扩增特定DNA片段的先进技术。其核心原理是模拟DNA的自然复制过程,通过DNA聚合酶以迅速扩增目标DNA。
PCR的基本原理
PCR的基本原理包括DNA的变性、退火和延伸三个循环步骤:这三个步骤构成一个循环,每完成一个循环,目标DNA的数量便翻倍。经过多轮循环,我们可以获得大量所需的DNA片段。
合适的PCR反应条件
为了建立一个成熟稳定的PCR反应,需要满足以下几个条件:
- 完整且纯净的模板(通过胶图和NanoDrop测量评估)
- 高特异性和高品质的引物(使用引物设计软件评分)
- 适宜的反应体系搭配(如根据模板的GC含量调整,考虑添加DMSO或甜菜碱,以及镁离子的浓度)
- 合理的扩增反应程序(多次实验确定最佳退火温度,接近引物的Tm值)
PCR仪的功能与优势
PCR仪的功能与设置直接关系到反应的成功与否。如果仪器具备温度梯度功能,可以通过调节不同的温度梯度,减少实验次数,快速确定最佳退火温度。尊龙凯时-人生就是博的柏恒梯度PCR仪(RePure系列)具有多种温度梯度选项,助力您的PCR实验:
常规梯度
单向设置退火温度的低值和高值,中间孔位则会渐进分布温度,虽然温度不一定是等差的。
线性梯度
可以在中间设置一个温度和相邻孔位的温差,设定温度将按温差向两边扩散,保障相邻孔位的温度严格按照设定生成。此功能是博力的创新,国产品牌中唯有尊龙凯时-人生就是博具备此优势。
二维梯度
反应模块的纵向和横向可同时设置常规或线性梯度,使得变性和退火在不同温度下同时进行,以一次反应探索出最佳的温度组合。这种方式具有多重优势:
- 提高PCR反应的特异性,减少非特异性杂交产生。
- 提升PCR产物的纯度,优化分子靶点,获得纯粹的扩增DNA。
- 检测基因突变,设计适当引物扩增目标基因片段以检测特定突变位点。
- 探索遗传多样性,借助序列比对器核验种群间的遗传差异。
- 操作简单,仅需配置一个反应体系。
- 提高阳性检测准确性,减少交叉污染,降低假阳性概率。
- 缩短实验时间,优化最佳反应温度。
独立6温区
相邻温区可设置不超过5℃的温差,以便同时摸索多个退火温度,以16孔设定复孔位。每个温区的温度可以根据要求灵活设计,相当于线性梯度的升级版。此外,柏恒梯度PCR仪采用前进风后出风的散热模式,确保即使多台设备并列使用,也不会影响温控准确性。
通过尊龙凯时-人生就是博的技术支持,您将能够更高效地进行PCR实验,优化实验的各个环节。